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产品简介

人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书

价格：电议

采购度：1630 原产地：中国大陆

发布时间：2019/3/25 9:17:17

公司有大量的优质细胞，还提供人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书的全程后期服务，可以向专业人士咨询详细的细胞培养条件，冻存方法，及相关培养技术。

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标签：生化试剂盒

详细信息

本公司供应的细胞，提供售前售后一条龙服务，若要获取详细的人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书说明书或价格信息。

人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书【Human Lung: Normal Pulmonary Artery Smooth Muscle Cell Derivatives】

人肺大动脉平滑肌细胞提取物是从人原代肺大动脉平滑肌细胞提取的，人原代肺大动脉平滑肌细胞从正常人肺大动脉平滑肌组织制备。正常人肺大动脉平滑肌组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western ａnd Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

人粒细胞集落激因子(G-CSF)elisa试剂盒英文名称：Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 规格:96T/48T小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产

人细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒英文名称：Human Cyclin-D1 ELISA Kit规格:96T/48T鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装

人Jo1抗体/抗组氨酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA试剂盒英文名称：Human Jo-1 Antibody,Jo1/HRS ELISA Kit规格:96T/48T人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG进口/国产

人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒英文名称：Human Relaxin,RLN ELISA Kit规格:96T/48T小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装

人1,25二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA试剂盒英文名称：Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit规格:96T/48T人钙结合蛋白(CR)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产

人对氧磷酶(PON)ELISA试剂盒英文名称：Human paraoxonase,PON ELISA Kit规格:96T/48T人α-内吗啡肽(α-EP)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒英文名称：Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3,MAPKAPK3 ELISA Kit规格:96T/48T小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装

人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒英文名称：Human islet cell antibody,ICA ELISA Kit 规格:96T/48T猴载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产

人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIV IgG )ELISA试剂盒英文名称：Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit规格:96T/48T大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产

人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒英文名称：Human ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装

人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）ELISA试剂盒英文名称：Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1，1BACE1 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产

人肺大动脉平滑肌细胞提取物说明书防御素β1抗原(人)Defensin Beta1(human)?0.5mg

β-抑制蛋白2抗体/β休止蛋白2/β-arrestin抗体英文名称：Beta arrestin 2?0.1ml

罗丹明标记的驴抗羊IgGDonkey Anti-Goat IgG/RBITC?0.1ml

APC标记的兔抗豚鼠IgGRabbit Anti-Guinea pig IgG/APC?0.1ml

9号染色体开放阅读框173抗体英文名称：C9orf173 ?0.2ml

Alexa Fluor 350标记的羊抗小鼠IgGGoat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 350?0.1ml

液泡蛋白分选受体SORCS3抗体英文名称：SORCS3?0.2ml

磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗体英文名称：Synaptojanin 2?0.2ml

磷酸化桩蛋白Paxillin抗体英文名称：Phospho-Paxillin (Tyr118)?0.1ml

坏死因子β抗体（TNFβ）英文名称：TNF beta?0.1ml

二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶2抗体英文名称：UGCGL2?0.2ml

更新时间：2024/3/14 11:44:48

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