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转基因大米Bt(cryAc)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书

转基因大米Bt(cryAc)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书

价格:电议

采购度:1032    原产地:中国大陆

发布时间:2022/2/23 19:10:59

转基因大米Bt(cryAc)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书的热销产品:GATA结合蛋白6抗体Anti-NOS-2/iNOS /FITC 荧光素标记一氧化氮合成酶-2抗体(诱导型)IgG
GLP-1单克隆抗体Anti-NOS-2/iNOS/FITC 荧

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标签:转基因大米Bt   cryAc   检测试剂盒   荧光-PCR法      

详细信息
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
货号
规格
转基因大米Bt(cryAc)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书
GOY-01P64539
50T
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
米曲霉锌指蛋白423抗体Anti-NKX2-5 Antibody内皮特异分子1(ESM1)ELISA试剂盒
杰丁塞伯林德纳氏酵母锌指蛋白239抗体Anti-NLRP2 Antibody内皮TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒
拟卵盖鹅膏菌锌指蛋白426抗体Anti-NLRC4 Antibody内皮素转化酶1(ECE1)ELISA试剂盒
桃叶点霉磷酸化锌指蛋白598抗体Anti-NKX2-1 Antibody内皮素受体B(ETRB)ELISA试剂盒
帚霉锌指蛋白423抗体Anti-NLRP3 Antibody内皮素受体A(ETRA)ELISA试剂盒
根瘤菌锌指蛋白830抗体Anti-NLRP3 Antibody内皮素3(EDN3)ELISA试剂盒
新疆盐地杆菌受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体Anti-NLRP4G  Antibody内皮素1(EDN1)ELISA试剂盒
盐古杆菌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体Anti-NMDAR2A Antibody内凝集蛋白2(ITLN2)ELISA试剂盒
红色雷夫松氏菌锌指蛋白925抗体Anti-NME1 Antibody内凝集蛋白1(ITLN1)ELISA试剂盒
大肠埃希菌线粒体二羧酸载体蛋白20抗体Anti-NME2 Antibody内肽2(EM2)ELISA试剂盒
旋丝毛壳长链脂肪酸转运蛋白1抗体Anti-NME1 Antibody内磺肽α(ENSα)ELISA试剂盒
酒质安全快检箱 (清单见备注)转录抑制蛋白Sin3b抗体Anti-NMU Antibody内分泌腺来源血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒
阿克苏海洋杆菌鞘磷脂合成酶1抗体Anti-NMI Antibody内β-N-乙酰基氨基葡糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒
葡座腔菌14-3-3 α + β蛋白抗体Anti-NNT Antibody脑指蛋白(BFP)ELISA试剂盒
拟青霉磷酸化14-3-3 β/ζ抗体Anti-NOG Antibody脑型脂肪酸结合蛋白(FABP7)ELISA试剂盒
黄孢紫红菇磷酸化14-3-3 τ抗体Anti-NOD1 Antibody脑型肌酸激酶(CKB)ELISA试剂盒
嗅觉受体家族2亚基4抗体就地堆肥地芽孢杆菌人肾上皮细胞提取物
嗅觉受体家族5亚基3抗体赖氨酸芽胞杆菌属人腹膜毛细血管内皮细胞提取物
嗅觉受体家族10亚基J3抗体气单胞菌属人脐动脉平滑肌细胞提取物
眼部白化病相关蛋白OA1/蛋白偶联受体143抗体蜡蚧轮枝孢(斜面)人冠状动脉内皮细胞提取物
转基因大米Bt(cryAc)检测试剂盒(荧光-PCR法)说明书甲萘醌;2-甲基-1,4萘二酮;2-甲基-1,4-萘醌;2-甲萘醌;β-甲萘醌;2-甲基-1,4-萘酚喹酮;2-甲基-1,4-萘酚喹酮;2甲基萘醌;甲奈醌
 VK3
其他 Menadione
产品规格: BR,98%
包装:10克/25克/100克
CAS号:58-27-5
含量:≥98.0%
熔点:105~107℃
鉴别:合格
干燥失重:≤0.3%
性状:粉末,有微辛辣的气味。在空气中稳定,在日光中分解。1G溶于约60ml乙醇、10ml苯、50ml植物油,溶于。不溶于水。乙醇溶液对石蕊试纸呈中性。溶液在热至120℃也不分解。遇碱和还原剂则被破坏。有毒,半数致死量(小鼠,经口)约500mG/kG。有刺激性。商品尚有亚亚硫酸氢钠甲萘醌,为粉末。无气味或微有特殊气味。有吸湿性。遇光易分解并变成黄色或紫色。易溶于水,微溶于乙醇,几乎不溶于苯。
用途:生化研究
保存:RT,避光

更新时间:2024/1/9 9:46:23

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