1、灵敏度高:可检测浓度低于1.0pg/ml的细胞因子含量,结果可靠;
2、样本量少:检测样本只需50ul,是珍贵样本检测的理想选择;
3、操作简便:操作流程简单明确,且试剂盒包括实验所有必需试剂;
4、设备简单:使用常规标准化酶标仪检测(450nm)。
ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化以及酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活
性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体反应,洗涤使固相载体上形成的抗原抗体复合物
与液体中的其他物质分开,再加入酶标记的抗原或抗体,通过反应使其结合在固相载体上。此时,固相上的酶含量与标本中受检物质的量呈一定的
比例。接着加入底物,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
ELISA检测 中一般涉及二次反应,即加标本后和加结合物。反应的温度和时间应按规定的要求,保温容器好是水浴箱,可使温度迅速平衡。各 ELISA 板不应叠放。为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒好是金属的,传热容易。如用保温箱,空湿盒应预先放在其中,以平衡温度,这在室温较低时更为重要。加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。如室温高于 20℃, ELISA 板可避光放在实验台上,以便不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
洗涤
洗涤在 ELISA 实验中虽不是反应过程,但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
ELISA 板的洗涤一般可采用以下方法:
① 吸干孔内反应液;
② 将洗涤液注满板孔;
③ 放置 2min,略作摇动;
④ 吸干孔内液,也可倾去液体后在吸水纸上拍干。
洗涤的次数一般为 3~4 次,有时甚至需洗 5~6 次.
半胱氨酸(Cys)含量测试盒
谷氨酸(Glu)含量测试盒
羟脯氨酸(HYP)测试盒
乙酰胆碱酯酶(AchE)测试盒
组织及血液酸性磷酸酶(ACP)测试盒
羧酸酯酶(CarE)测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性测试盒
线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒
α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒
柠檬酸(CA)含量测试盒
琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒
丙酮酸脱氢酶(PDH)测试盒
线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒
柠檬酸合酶(CS)测试盒