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腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素

阅读次数:394   发布时间:2022/3/29 14:33:58

 腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
人干扰素诱导T细胞α亚族趋化因子 (I-TAC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit
人基质细胞衍生因子1(SDF-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human SDF-1 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit
人B-淋巴细胞趋化因子(BLC)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BLC (B-Lymphocyte Chemoattractant) ELISA Kit
人趋化因子CXC配体16(CXCL16)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CXCL16 (Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16) ELISA Kit
人胱抑素C(Cys-C)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit
人细胞色素C(Cyt-C)酶联免疫吸附测定试剂盒Human Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit
人Dickkopf相关蛋白1 (DKK1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human DKK1 (Dickkopf Related Protein 1) ELISA Kit
人二肽基肽酶IV(DPP4)酶联免疫吸附测定试剂盒Human DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) ELISA Kit
人表皮生长因子(EGF)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EGF (Epidermal Growth Factor) ELISA Kit 
人表皮生长因子受体(EGFR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit
人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 
人内皮糖蛋白(ENG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ENG (Endoglin) ELISA Kit
人内皮抑制素(ES)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ES (Endostatin) ELISA Kit
人内皮素1(ET-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit
人内皮细胞蛋白C受体(EPCR)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit
人促红细胞生成素(EPO)酶联免疫吸附测定试剂盒Human EPO (Erythropoietin) ELISA Kit 
人凋亡相关因子(FAS/CD95)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FAS/CD95 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 
人凋亡相关因子配体(FASL/TNFSF6)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human FASL/TNFSF6 (Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit 
人脂肪酸结合蛋白1(FABP1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human FABP1 (Fatty Acid Binding Protein 1, Liver) ELISA Kit
 

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