主营产品:

PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。$r$n$r$n
服务热线:

021-39921927

联系我们/CONTACT US

联系人:陈小姐

电 话:021-39921927

手 机:18321818584

地 址:上海松江区新砖公路1290号

邮 编:200000

传 真:

邮 箱:3004918891@qq.com

阿仪网商铺:http://www.app17.com/c130377/

产品分类/PRODUCT CLASS

公司新闻

猫肾细胞;CRFK培养步骤

阅读次数:794   发布时间:2021/3/15 16:09:07

猫肾细胞;CRFK培养步骤:
 
.豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5说明书培养基及培养冻存条件准备:
 
1) 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基,使293T细胞悬浮生长。
 
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
 
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
二. 细胞处理:
 
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
 
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
 
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
 
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
 
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
 
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
 

首 页| 公司介绍| 产品展示| 公司新闻| 技术文章| 联系我们| 客户留言

阿仪网 设计制作,未经允许翻录必究. 联系人:陈小姐 联系电话:021-39921927 总访问量:3754791 管理登录

主营产品:PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。$r$n$r$n