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细胞培养中出现黑点应该如何处理?

阅读次数：818   发布时间：2020/7/16 13:48:16

 细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?
“小黑点”问题是很多细胞培养者已经发现的问题，但到目前为止尚未找到其监测和排除的试剂和手段，这首先是由于所谓“小黑点”病原体根本难以收集和捕捉， 这也从另一个侧面证明了“小黑点”问题的难以确定性；再说任何一种外来的微生物在培养基中都会有生命活动的反应和表现，而不是简单地运动那样的外观性表现。

一旦在细胞培并的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如杲细胞被污染,徹生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄变混出,污染包括细直污染、支原休污如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与票点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情況有关

1细抱生长过老,破碎的细胞残骸
2血清质量不好,反复冻融的结果
3配制培养基的pH值偏高,不宣细胞生
4配制培养基的水质、容器不合格。可应用高心、过的方法去除这些黒点
5培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。

细胞培养中如何防止黑点生成：
1） 掌握细胞传代的*佳时机，细胞切勿生长过老；
 
2） 尽可能地减少血清冻融次数；
 
3） 培养基无需37℃水浴；
 
4） 培养基保持*佳PH值7.0- 7.2；
 
5） 严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。
 

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