一种细胞聚集体的制备步骤方法有哪?
阅读次数:624 发布时间:2020/3/24 14:14:38
随着近年对人ES细胞、人iPS细胞等人多能干细胞的研究,再生医疗的实用化的可能性正在增加。这些细胞具有能够无限增殖的能力和分化为各种细胞的能力,因此期待使用了多能干细胞的再生医疗可根本性地改变对疑难疾病、生活习惯病等的治疗方法。已经能够在试管内从多能干细胞分化诱导为以神经细胞为代表的心肌细胞、血液细胞及网膜细胞等各种细胞。作为面向使用多能干细胞对各种脏器进行再生的再生医疗的实用化的课题,有如何高效地生产脏器再生所需要的大量细胞的课题。例如,肝脏的再生需要约2×1011个细胞。通过在平坦的基板上的贴壁培养来培养上述个数的细胞需要106cm2以上的基板,以普通的10cm培养皿计,这相当于约20,000个的量分。对于基板表面上的贴壁培养而言,由于得到的细胞数量依赖于培养面积,因此难以扩大规模,难以供给再生医疗所需要的足够量的细胞。在液体培养基中使细胞悬浮并进行培养的悬浮培养容易进行规模扩大,可以期待其适于细胞的大量生产。非文献3中公开了一种制备均匀大小的球状体的方法,该方法包括:使用悬浮培养瓶(spinnerflask)作为悬浮培养的细胞培养容器,并在通过强大的搅拌力对液体培养基进行搅拌的同时进行人多能干细胞的悬浮培养。非文献4中公开了一种使用形成了微小的微孔的基板在各微孔中制备均匀大小的球状体的方法。非文献5中公开了如下方法:使用调整了粘性、比重的培养基作为培养基,保持多能干细胞的悬浮状态,并且在抑制细胞彼此碰撞的同时进行培...
一种细胞聚集体的制备方法,该方法包括:在含有溶血磷脂的液体培养基中使细胞悬浮并进行培养的工序。2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述液体培养基含有大于0.0064μg/mL且100μg/mL以下的所述溶血磷脂。3.根据权利要求1或2所述的方法,其还包括下述工序中的至少一者:添加所述溶血磷脂来制备所述液体培养基的工序,以及通过酶反应生成所述溶血磷脂来制备所述液体培养基的工序。4.根据权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,所述细胞是在贴壁或悬浮进行培养后经过分离的细胞。5.根据权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,所述溶血磷脂是溶血磷脂酸及鞘氨醇-1-磷酸中的至少一者。6.根据权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,所述液体培养基含有选自L-抗坏血酸、胰岛素、运铁蛋白、硒及碳酸氢钠中的至少一者。7.根据权利要求1~6中任一项所述的方法,其中,所述液体培养基含有生长因子。8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述生长因子是F...