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转基因元件tml3终止子LAMP试剂盒实验过程

点击次数：2403   发布时间：2022/9/21 13:44:28

 转基因元件tml3终止子LAMP试剂盒实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃chang期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
AP2关联激酶1抗体
水通道蛋白1抗体
AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体
ATP结合蛋白家族5抗体
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶
AU5 tag标签抗体
钙离子ATP酶通道蛋白抗体
果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体
脂肪炎症因子Apelin抗体
氢钾ATP酶通道蛋白抗体
ATP5A抗体
即刻早期基因ARC抗体
ADP核糖基化因子6抗体
芳香化酶抗体
Artemin抗体
alpha 1肾上腺素能受体A抗体
血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体
活化转录因子3抗体
血管紧缩素样蛋白1抗体
自噬相关蛋白7抗体
炭疽毒素受体2抗体
自噬相关蛋白4C抗体
自噬蛋白5/细胞凋亡的特异性蛋白抗体
 

原创作者：上海谷研实业有限公司

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